FISH（熒光原位雜交）

熒光原位雜交用於(yu) 通過互補探針序列的雜交來顯示確定的核酸序列。FISH 有很多應用，從(cong) 基本的基因定位到染色體(ti) 畸變的診斷（細胞遺傳(chuan) 學）。多色 FISH 圖像分析需要使用單獨的濾光片激發塊（立方體(ti) ）或激發濾光片轉輪結合多波段二向色鏡和發射濾光片來隔離各種信號。

熒光免疫原位雜交（FISH）和 多路複用（Densely Multiplexed）成像的串色

當同時使用具有多個(ge) 密集光譜的熒光染料時，區分熒光標記的能力決(jue) 定了檢測結果的速度和準確性。在進行熒光免疫原位雜交 （FISH）測量時，這種密集的圖像複用特別重要。因此，減少串色（即來自不希望的熒光染料的信號相對於(yu) 所需熒光染料的信號影 響）至關(guan) 重要。下表量化了使用特定的
BrightLine 熒光免疫原位雜交（FISH）濾光片組時，相鄰熒光染料之間的串擾值。該串擾值 決(jue) 定於(yu) 典型的歸一化熒光染料光譜、濾光片的設計光譜和強金屬鹵化物燈光譜的重疊。

這些結果已經針對每個(ge) 給定的濾光片組進行了標準化，因此用戶應該讀取每行（而不是每列）的值以查看給定濾光片組的預期串擾值。

例如，當使用 SpectrumGold™ 濾光片組對標記有 SpectrumGreen™、SpectrumGold™ 和 SpectrumRed™ 熒光染料的樣品進行 成像時，不需要的 SpectrumGreen 信號將小於(yu) 所需要的 SpectrumGold 信號的 2%，並且 SpectrumRed 信號將小於(yu) 1%。

好的濾光片會(hui) 帶來哪些不同 ?

BrightLine“不易燒熔"濾光片在多年的使用中，在研究和臨(lin) 床領域都得到了廣泛的測試。BrightLine 熒光免疫原位雜交 FISH 濾光片組也進行了嚴(yan) 格的獨立測試。結果顯示：使用 BrightLine 濾光片組進行熒光免疫原位雜交 FISH 分析時，無論您是查找 和分析中期分裂，還是通過點計數對細胞進行評分，都可以提高分析的速度和準確性。

熒光濾光片簡介

一個(ge) 分子吸收其吸收譜帶波長範圍（即吸收光譜）內(nei) 的光，然後幾乎瞬間發出較長的、位於(yu) 其發射譜帶波長範圍（即發射光譜）內(nei) 的光，此時，就會(hui) 發生光學熒光。為(wei) 了達到分析的目的，強的熒光分子，亦被稱為(wei) 熒光團、熒光染料，專(zhuan) 門用於(yu) 連接到生物分子或其他感興(xing) 趣的目標，用於(yu) 鑒定、定量、甚至實時觀察物質的生物和化學活性。熒光染料因為(wei) 具有*的靈敏度、高特異性和簡單性，被廣泛應用於(yu) 生物技術和分析檢測中。大多數熒光儀(yi) 器，包括熒光顯微鏡，都是基於(yu) 光學濾光片。

一個(ge) 典型的係統有三個(ge) 基本的濾光片組成：激發濾光片（或吸收濾光片），二向色鏡分束鏡（或二向分色鏡）和發射濾光片（或阻擋濾光片）。激發濾光片通常是一個(ge) 帶通濾光片，它隻透過熒光染料的吸收波長，從(cong) 而最大限度地減少熒光的其他來源的激發光和阻擋熒光發射帶內(nei) 的激發光。二向色鏡分束鏡是一種邊緣濾光片，用於(yu) 斜角入射 （通常是 45 °），以有效地反射激發波段的光和透射發射波段的光。Semrock 發射濾光片通常是一個(ge) 帶通濾光片，僅(jin) 透過熒光染料的發射波長，並阻擋這個(ge) 波段之外的所有不需要的光 - 尤其是激發光。通過濾光片阻擋不需要的激發能量（包括紫外和紅外）或樣品和係統的自發熒光，就可以得到具有黑暗背景的熒光圖像。

我們(men) 可以通過選擇適當的光學濾光片，組成一個(ge) 濾光片組，用於(yu) 觀察熒光或者對熒光進行成像，這樣就可以達到使一個(ge) 給定的熒光染料可視化的目的。因為(wei) 不同熒光染料的激發光譜和發射光譜不同，濾光片組需要優(you) 化，才可以用於(yu) 不同熒光染料的同時成像。在不同的實驗條件下使用同一個(ge) 熒光染料時，濾光片組也需要優(you) 化。